干擾素能刺激某些指示細胞(如人羊膜上皮細胞Wish株、人喉癌細胞株Hep-2、人胚肌皮、肺單層細胞等)產生抗病毒蛋白,從而使細胞免受水皰性口炎病毒(VSV)的攻擊,根據待測樣品不同稀釋度的保護能力,計算出干擾素生物學活性單位。
【材料】 VSV、Wish細胞、MTT、二甲亞砜(DMSO)、10%FCS RPMI1640、培養(yǎng)板、培養(yǎng)瓶、CO2孵箱、超凈臺、酶標檢測儀。
【結果】
以保護半數(50%)細胞免受病毒損害的zui高干擾素稀釋度為1個干擾素活性單位。也可從標準曲線中求得待測樣品的IFN活性單位。
【注意事項】
1、實驗時先加IFN,后加指示細胞,以使細胞均勻分布于培養(yǎng)板底部。
2、本法對天然培養(yǎng)上清或重組IFN-α、IFN-β和IFN-γ均可檢測其活性單位。